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ELISA夹心法原理及​一般操作步骤

日期:2024-11-01 08:10
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摘要: ELISA夹心法原理及一般操作步骤: 夹心法常用于检测大分子抗原. 原理:针对抗原分子上2个不同抗原决定簇的单克隆抗体分别作为固相抗体和酶标抗体,将大分子抗原分别制备固相抗原和酶标抗原结合物。一般的操作步骤为: 1. 将具有专一性的抗体固著(coating)于塑胶孔盘上,完成后洗去多余抗体。 2. 加入待测检体,检体中若含有待测的抗原,则其会与塑胶孔盘上的抗体进行专一性键结。 3. 洗去多余待测检体,加入另一种对抗原专一的一次抗体,与待测抗原进行键结。 4. 洗去多余未键结一次抗体,加...

ELISA夹心法原理一般操作步骤

夹心法常用于检测大分子抗原. 原理:针对抗原分子上2个不同抗原决定簇的单克隆抗体分别作为固相抗体和酶标抗体,将大分子抗原分别制备固相抗原和酶标抗原结合物。一般的操作步骤为:

1. 将具有专一性的抗体固著(coating)于塑胶孔盘上,完成后洗去多余抗体。

2. 加入待测检体,检体中若含有待测的抗原,则其会与塑胶孔盘上的抗体进行专一性键结。

3. 洗去多余待测检体,加入另一种对抗原专一的一次抗体,与待测抗原进行键结。

4. 洗去多余未键结一次抗体,加入带有酶的二次抗体,与一次抗体键结。

5. 洗去多余未键结二次抗体,加入酶底物使酵素呈色,以肉眼或仪器读取呈色结果。