参数规格:
产品名称 |
猪瘟病毒RT-PCR试剂盒荧光PCR检测试剂盒 |
英文名称 |
详见说明 |
货号 |
BJ-R015282 |
产品运输:低温运输
产品保存:-20℃保存
产品有效期:一年
产品特点:
◇高特异性:与其他病毒无交叉反应,无非特异性扩增;
◇高灵敏度:检测灵敏度可达10~100拷贝;
◇操作简便:该系列所有试剂均采用相同的体系和条件,可同时进行多个检测;
◇高通量:多种双重PCR检测以及三重PCR检测试剂盒。
实验过程:
一、试剂准备
1. DNA模板
2.对应目的基因的特异引物(在PCR反应中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制,而不能从无到有,凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根据你的模板链设计。因此,扩增不同的基因需要设计不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步骤
1.在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5μl
dNTP mixl
4μl
引物1(10pM)
2μl
引物2(10PM)
2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2.调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,zui后在72℃ 保温7min。
3.结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4.PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μlLuFang进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
使用方法:
注:所有试剂使用前需完全解冻,混合均匀,6,000rpm离心数秒后使用。
1. 样本处理(样本处理区)
待检样本的核酸提取可采用病毒RNA提取试剂盒或自动化核酸提取仪等,具体提取方法请参照相关说明书;阳性质控品及阴性质控品无需提取,可直接使用。
2. 扩增试剂准备(PCR前准备区)
取N个(N=阴性质控品+待检样本+阳性质控品)PCR反应管,每管分别加入FMD RT-PCR反应液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根据每头份用量计算N+1份FMD RT-PCR反应液、RT-PCR酶所需总量,两者混匀离心后分装20 μl至单个PCR反应管)。
组分每头份用量FMD RT-PCR反应液19 μlRT-PCR酶。
1 .将所有PCR反应管于6,000rpm离心30s,转移至样本处理区。
2.加样(样本处理区)
3.在上述的PCR反应管中分别加入待检样本RNA提取物、阴性质控品和阳性质控品各5 μl,盖紧管盖,于6,000rpm离心10s,转移至扩增区。
Sars结构蛋白表达株;293sars181AAmberlite XAD-4 非离子型大孔树脂(粒径0.49 - 0.69 mm)质量规格:粒径0.49 - 0.69 mmAmberlite XAD4
HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人细胞裂解液 (阳性对照) 茴香1(分析标准品,用于萜1分析,≥99.5% (GC))质量规格:分析标准品,用于萜1分析,≥99.5% (GC)trans-Anethole
CL-0224SW579(人甲状腺鳞癌细胞 )5×106cells/瓶×2山嵛酸(标准品)质量规格:分析标准品Behenic acid
PARP1 Others Human 人 PARP-1 / PARP 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 乙基叔丁基(标准品)质量规格:分析标准品tert-Butyl ethyl ether
人成纤维细胞cDNAHLF cDNAADP.Na2; 5'-二1酸腺苷二钠/腺苷-5'-二1酸二钠盐质量规格:>95.0%,BRAdenosine-5'-diphosphate di
salt(ADPna)
人胚肾二倍体细胞;HEK-2 人直肠平滑肌细胞完全培养基 100mLNADTRIHYDRATE氧化型辅酶Ⅰ试剂级米白色冻干粉FROZENsigma
人肾系膜细胞RNAHRMC miRNA5 μg4,4’-二羌基二本同 4,4'-Dixy7noxybqnzophqnonq 611-99-4
ADK Others Human 人 ADK 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) SCCRAM肉汤250克RT
水貂肺上皮细胞;Mv.1.Lu(NBL-7)4-metxYLUMBELLIFERYLPHOSPHATE4-甲基伞花基嶙酸钠三水 (MUP)超级白色至灰白色粉末FROZENsigma
SHG-44细胞,胶质瘤细胞 NCTC克隆929细胞,L129细胞 人T瘤细胞Jurkat亚系;Jurkat77(福林酚)
猪瘟病毒RT-PCR试剂盒荧光PCR检测试剂盒人肺转化细胞;AE1201Dipxenylcarbazone二本基卡巴腙25克CP,13.5-15.5%
猞猁皮肤成纤维样细胞;ELS1 大鼠肾细胞,NRK细胞 NBTF细胞,新生牛眼Tenon's囊成纤维细胞还原型辅酶Ⅰ二内盐(+4°C) bqtc-Nicotincmidq cdqninq dinuclqotidq diwo7ium sclt 606-68-8
人羊膜细胞;WISH苔酚 Orcinol monohydrate (≥99%, from liche... 6153-39-5 5G 染色剂
HA Others H12N5 甲型流感 H12N5 (A/green-winged teal/ALB/199/1991) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人细胞裂解液 (阳性对照) Coronene六本并本1克CP
SF9, 昆虫卵巢细胞L-OrnithineHCl 10g/25g/50g/100g 国产
注意事项:1.基础程序;2.扩增温度和延伸温度;3.反应时间;4.循环次数;5.PCR 反应液的配制;6.PCR技术的基本原理;7.PCR的反应动力学;8.PCR扩增产物;9.PCR反应体系与反应条件。产品仅用于科研