参数规格:
产品名称 |
副流感病毒Ⅱ型荧光PCR检测试剂盒 |
英文名称 |
详见说明 |
货号 |
BJ-R015220 |
产品运输:低温运输
产品保存:-20℃保存
产品有效期:一年
产品特点:
◇高特异性:与其他病毒无交叉反应,无非特异性扩增;
◇高灵敏度:检测灵敏度可达10~100拷贝;
◇操作简便:该系列所有试剂均采用相同的体系和条件,可同时进行多个检测;
◇高通量:多种双重PCR检测以及三重PCR检测试剂盒。
实验过程:
一、试剂准备
1. DNA模板
2.对应目的基因的特异引物(在PCR反应中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制,而不能从无到有,凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根据你的模板链设计。因此,扩增不同的基因需要设计不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步骤
1.在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5μl
dNTP mixl
4μl
引物1(10pM)
2μl
引物2(10PM)
2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2.调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,zui后在72℃ 保温7min。
3.结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4.PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μlLuFang进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
使用方法:
注:所有试剂使用前需完全解冻,混合均匀,6,000rpm离心数秒后使用。
1. 样本处理(样本处理区)
待检样本的核酸提取可采用病毒RNA提取试剂盒或自动化核酸提取仪等,具体提取方法请参照相关说明书;阳性质控品及阴性质控品无需提取,可直接使用。
2. 扩增试剂准备(PCR前准备区)
取N个(N=阴性质控品+待检样本+阳性质控品)PCR反应管,每管分别加入FMD RT-PCR反应液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根据每头份用量计算N+1份FMD RT-PCR反应液、RT-PCR酶所需总量,两者混匀离心后分装20 μl至单个PCR反应管)。
组分每头份用量FMD RT-PCR反应液19 μlRT-PCR酶。
1 .将所有PCR反应管于6,000rpm离心30s,转移至样本处理区。
2.加样(样本处理区)
3.在上述的PCR反应管中分别加入待检样本RNA提取物、阴性质控品和阳性质控品各5 μl,盖紧管盖,于6,000rpm离心10s,转移至扩增区。
大鼠角膜上皮细胞完全培养基 100mL氯唑沙宗质量规格:>98.5%,BRChlorzoxazone
Hep3B人肝癌细胞 Hep3B human hepatocarcinoma cells DMEM+10% FBS氯唑沙宗(标准品)质量规格:HPLC>98%,标准品Chlorzoxazone
IL18 Protein Human 重组人 IL18 / Ierleukin 18 / IGIF 蛋白 (GST 标签)D-氨基葡萄糖盐酸盐质量规格:>98.5%,BRD-Glucosamine
NCI-H520(人肺鳞癌细胞) 5×106cells/瓶×2 A549 [A-549](肺癌细胞)奥卡西平质量规格:≥99.0%,BROxcarbazepine
CL-0448SW
1990(人胰腺癌细胞)5×106cells/瓶×2奥卡西平(标准品)质量规格:HPLC>99%,标准品Oxcarbazepine
MRC-5-EGFP+puro人胚肺成纤维细胞 MRC-5-EGFP+puro in human embryo lung fibroblasts
MEM+10%Hyclone灭清+2ug/ml puromycin盐酸喹那普利(标准品)质量规格:HPLC法含量测定Quinapril
TNFSF13B Protein Cynomolgus 重组食蟹猴 BLyS / TNFSF13B / BAFF 蛋白 (Fc 标签)爱普列特(标准品)质量规格:UV法含量测定Epristeride
人角膜上皮细胞 (HcorF)( 5×105 ) 293T, SV40转化的人胚肾上皮细胞系 Human羟苯磺酸钙(标准品)质量规格:含量测定Calcium dobesilate
人胰腺导管癌细胞;CFPAC-1异鼠李素-3-O-葡萄糖-7-O-鼠李糖苷(标准品)质量规格:HPLC≥95%,标准品Isorhamnetin 3-glucoside-7-rhamnoside
BMPR1B
Others Human 人 BMPR1B / ALK-6 (149-502) 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 5'-tert-Butyldimethylsilyloxy 美洛昔康质量规格:美国进口5'-tert-Butyldimethylsilyloxy Meloxicam
副流感病毒Ⅱ型荧光PCR检测试剂盒786-O(人肾透明细胞癌细胞) 5×106cells/瓶×2SULFATE1MSTERILE无菌溶液生物技术级100ML10034-99-8RT
IL8 Others Human 人 IL-8 (aa 6-77) 人细胞裂解液 (阳性对照) 三基硅基 (TRIMqTHYLSILYL)MqTHYLlitxium 18-00-0
草鱼肾细胞;GIKMcgnqsiuM 7439-92-4
AMPK Others Human 人 AMPK (G1/B1/A2) Heteroimer 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) TBEPOWDER-DIwo7iumTBE 缓冲液粉末包超级2 PackRT
CL-0258BC-019(人癌细胞)5×106cells/瓶×271098-88-9N-(本硒基)本 94%N-(pxenYLSELENO)PHTHALIMIDE
注意事项:1.基础程序;2.扩增温度和延伸温度;3.反应时间;4.循环次数;5.PCR 反应液的配制;6.PCR技术的基本原理;7.PCR的反应动力学;8.PCR扩增产物;9.PCR反应体系与反应条件。产品仅用于科研