抗体的制备过程:
1. M Y原:普通的大分子蛋白,通过分子克隆构建载体并在大肠杆菌中进行诱导表达获得重组蛋白,纯化鉴定后可直接作为M Y原;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶联载体对该分子进行改造才能使其成为具有M Y原性的抗原,常见偶联载体如BSA、OVA、HAS等。
2. M Y动物:常用于制备抗血清的动物有豚鼠、家兔、鸡、大小鼠等,大量**时需要用到狗、绵羊、山羊等。
3. M Y血清的收集:一般家兔、绵羊、山羊可采用静动脉采血,家兔、豚鼠、大鼠、鸡可采用心脏采血,家兔、山羊、绵羊可采用静脉采血。
4. M Y血清的纯化与鉴定:得到的抗血清需要进一步的纯化,利用偶联了抗原的亲和柱进行层析,具有高效,特异性强,纯度高的特定。接着要鉴定纯化蛋白的含量、相对分子的质量、纯度以及特异性。
5. M Y血清的保存:抗体一般比较稳定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存约5年而不会影响效价,而真空干燥保存时间可以更久。保存前需经并添加防腐剂。
产品名称 |
Anti-phospho-VAV3(Tyr173)抗体 |
规 格 |
0.1ml/100μg |
货号 |
BJ-K95851 |
英文名称 Anti-phospho-VAV3(Tyr173)
中文名称 磷酸化鸟嘌呤核苷酸交换因子VAV3抗体
浓 度 1mg/1ml
规 格 0.1ml/100μg
抗体来源 Rabbit
克隆类型 polyclonal
别 名 VAV3(phospho Y173); Guanine nucleotide exchange factor VAV3; Protein vav 3; Protein vav3; VAV 3; Vav 3 guanine nucleotide exchange factor; VAV 3 oncogene; VAV 3 protein; VAV-3; Vav3; VAV3 oncogene; VAV3 protein; VAV3_HUMAN.
交叉反应 Human, Mouse, Rat
产品类型 一抗 磷酸化抗体
研究领域 肿瘤 学 信号转导 转录调节因子 G蛋白偶联受体
蛋白分子量 predicted molecular weight: 98kDa
性 状 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated Synthesised phosphopeptide derived from human VAV3 around the phosphorylation site of Tyr173
亚 型 IgG
纯化方法 affinity purified by Protein A
储 存 液 0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Sodium azide
产品应用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500
对照/标本无染色 产品仅用于科研
① 确认是否忽略了应该加的某种试剂,包括一抗、二抗、三抗及底物等。
② 确认所有的试剂是否按正确的顺序加入,是否孵育了足够的时间。
③ 对照抗体的标签确认是否使用了正确的抗体,以及所用的检测系统是否和一抗匹配,这一点是非常重要的。比如,如果一抗是兔来源的抗体,二抗一定要用抗兔的二抗来匹配;或一抗是小鼠的IgM一抗,二抗必须是山羊/兔抗小鼠的IgM(不是IgG)二抗。
④ 检查抗体所使用的稀释度及稀释溶液。
⑤ 检查抗体的有效期和保存条件,尤其是标记了酶或荧光素的抗体,现在大多数试剂公司的抗体均要求在4~8℃条件下保存,应避免反复冻融,试剂保存时一定要避免与挥发性有机溶剂同放一室,以免降低抗体的效价。
⑥ 检查标本的储存条件,好用已知阳性的标本来同时做阳性对照。
⑦ 检查色原/底物溶液,简单的检测方法是将一滴标记有酶的抗体加入到制备好的底物溶液中,如果底物发生预期的颜色变化,则可排除底物的因素。需要注意的是,有些底物在制成工作液后应在一定时间内用完,否则会失效。
⑧ 检查冲洗液是否和反应试剂匹配,溶液的pH值很重要,与过氧化物酶底物匹配的溶液中不应含有叠氮钠。
⑨ 检查复染剂和封片剂是否和所使用的色原匹配。
弱阳性
如果阴性对照没有染色而阳性对照标本弱阳性,除了考虑上述因素外,还应考虑:
① 标本的固定方式,不当的固定方式或固定时温度过高,都会影响到所检测的抗原的数量和质量。
② 不适当的抗原修复方式,由于石蜡切片在制作的过程中固定剂对抗原的封闭作用,必须用抗原热修复或酶消化或两种同时使用的抗原双暴露法,至于使用哪一种方法,应参照**厂家的说明,同时结合标本的具体情况而定。
③ 抗体的稀释度是否过高或者孵育的温度/时间是否正确。一般试剂**厂家都会对试剂给出一定的使用范围,但是由于使用者的标本来自各种组织,处理过程也不尽相同,所以应参照使用范围,对所使用的一抗进行梯度测试,找出佳的使用浓度。
④ 切片上了过多的冲洗液,当抗体加至切片上时,等于人为地对抗体进行了进一步的稀释。
⑤ 孵育时切片是否放置水平,否则会导致抗体流失。
如果阴性对照没有反应,阳性对照反应良好,而标本弱阳性,则可能是由于阳性对照不是同一种咨询组织、或固定方式不同等原因所致。
Anti-PKC gamma/SCA14/FITC 荧光素标记蛋白激酶C亚型G抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
human IgG (亲和化) 人IgGMulti-class antibodies规格: 10mg
人类疱疹病毒8抗体 Anti-HHV8/ORF K2/vIL-6 0.1ml
Rabbit Anti-Monkey IgM 兔抗猴IgM 1mg
FAM76A 英文名称: FAM76A蛋白抗体 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-ROCK2(Thr249) 0酸化Rho相关蛋白激酶2抗体 规格 0.1ml
human IgG (亲和化) 人IgGMulti-class antibodies规格: 10mg
Anti-SPARC/FITC 荧光素标记富含半胱氨酸的酸性分泌蛋白抗体IgGMulti-class antibodies规格: 0.2ml
Endothelin-1 内皮素-1(多肽抗原)Multi-class antibodies规格: 0.5mg
腺苷酸环化酶激活肽受体-II/血管活性肠肽受体-II抗体 Anti-PACAP/VIP receptor 0.2ml
SEMCAP3 英文名称: SEMCAP3蛋白抗体 0.2ml
E. coli LPS 英文名称: 大肠杆菌脂多糖抗体 0.2ml
Rhesus antibody Rh Phospho-NFKB1(Thr932) 0酸化细胞核因子p50/k基因结合核因子抗体 规格 0.1ml
Endothelin-1 内皮素-1(多肽抗原)Multi-class antibodies规格: 0.5mg
Anti-phospho-VAV3(Tyr173)抗体兔脂氧合酶同工酶 英文名称: Rabbit Lipoxygenase Isozymes 规格: 48T/96T 英文缩写: LOXI 5'-Deoxy-5-fluorocytidine 66335-38-4 中文名: 分子式:C9H12FN3O4
兔脂肪细胞型脂肪酸结合蛋白(rabbit A-FABP) 作用: ELISA 规格: 48T/96T 进口分装 6,6'-Di-O-sinapoylsucrose 1068661-35-7 中文名:6,6'- 二芥子酰基蔗糖 分子式:C34H42O19 度:97.0% 关键词:
兔脂蛋白α(Lp-α)ELISA试剂盒 96T/48T 试剂盒 组装/原装 6,7-Dihydroneridienone A 中文名: 分子式:C21H28O3
兔脂蛋白α(Lp-α)ELISAKit ELISA. 96T/48T 6-(5-Chloropyridin-2-yl)-7-hydroxy-6,7-dihydro-5H-pyrrolo[3,4-b]pyrazin-5-one 43200-81-3 中文名: 分子式:C11H7ClN4O2 度:98.0% 关键词:
兔增殖细胞核抗原elisa试剂盒 兔增殖细胞核抗原试剂盒 规格型号:96T/48T 兔增殖细胞核抗原试剂盒,规格型号:96T/48T,来源:elisa试剂盒(进口分装),产品别名:兔增殖细胞核抗原试剂盒、兔增殖细胞核抗原elisa试剂盒 保存条件:2-8℃ 保质期:6个月。 6-Aminonicotinic acid 3167-49-5 中文名:6-氨基烟酸 分子式:C6H6N2O2