己糖激酶检测试剂盒检测原理
日期：2025-06-16 05:45
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摘要：
己糖激酶（Hexokinase）广泛存在于动植物、微生物和培养细胞中，是糖酵解途径中控制葡萄糖代谢速率的**个关键酶，可催化葡萄糖转化为6-磷酸葡萄糖，在机体代谢过程中发挥着重要作用。
己糖激酶可催化葡萄糖和ATP**葡萄糖-6-磷酸（G-6-P）和ADP，葡萄糖-6-磷酸脱氢酶（G-6-PD）可催化葡萄糖-6-磷酸脱氢**6-磷酸葡萄糖酸（6-PGA），同时使NADP+还原成NADPH，NADPH在340 nm处具有特征吸收峰，通过吸光值变化即可表征己糖激酶的活性。
己糖激酶检测原理
测定过程中所需要的仪器和试剂：紫外分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿（光径=1 cm）/96孔UV板、研钵/匀浆器、可调式移液器/多道移液器、台式离心机、恒温水浴/培养箱和蒸馏水。
1.粗酶液的制备（可根据预实验结果适当调整样本量和比例）
①**或细胞：离心收集**或细胞至离心管内，按照**或细胞数量（10个）：提取液体积（mL）为（500-1000）：1的比例（建议500万**或细胞加入1 mL提取液）处理样品，冰浴超声破碎（功率20%或200 W，超声3 s，间隔10 s，重复30次），4℃ 8000 g离心10 min，取上清置于冰上待测。
②组织：按照组织质量（g）：提取液体积（mL）为1：（5-10）的比例（建议称取0.1 g组织，加入1 mL提取液）处理样品，冰浴匀浆，4℃ 8000 g离心10 min，取上清置于冰上待测。
③血清（浆）、培养液等液体样本：直接检测或适当稀释后再进行检测。
己糖激酶可催化葡萄糖和ATP**葡萄糖-6-磷酸（G-6-P）和ADP，葡萄糖-6-磷酸脱氢酶（G-6-PD）可催化葡萄糖-6-磷酸脱氢**6-磷酸葡萄糖酸（6-PGA），同时使NADP+还原成NADPH，NADPH在340 nm处具有特征吸收峰，通过吸光值变化即可表征己糖激酶的活性。
己糖激酶检测原理
测定过程中所需要的仪器和试剂：紫外分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿（光径=1 cm）/96孔UV板、研钵/匀浆器、可调式移液器/多道移液器、台式离心机、恒温水浴/培养箱和蒸馏水。
1.粗酶液的制备（可根据预实验结果适当调整样本量和比例）
①**或细胞：离心收集**或细胞至离心管内，按照**或细胞数量（10个）：提取液体积（mL）为（500-1000）：1的比例（建议500万**或细胞加入1 mL提取液）处理样品，冰浴超声破碎（功率20%或200 W，超声3 s，间隔10 s，重复30次），4℃ 8000 g离心10 min，取上清置于冰上待测。
②组织：按照组织质量（g）：提取液体积（mL）为1：（5-10）的比例（建议称取0.1 g组织，加入1 mL提取液）处理样品，冰浴匀浆，4℃ 8000 g离心10 min，取上清置于冰上待测。
③血清（浆）、培养液等液体样本：直接检测或适当稀释后再进行检测。