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ELISA测定中出现问题的可能的四个原因

日期:2025-06-15 13:02
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摘要: ELISA测定中出现问题的可能原因(非试剂盒本身的原因),总结如下: 1、弱阳性质控样本检测不出温育的时间或温度不够;显色反应时间太短;所用配制缓冲液的蒸馏水有问题。 2、测定的重复性差,这是由于测定操作引起的问题,包括 ①加样本及试剂量不准;孔间不一致 ②加样过快,孔间发生污染 ③加错样本 ④加样本及试剂时,加在孔壁 ⑤不同批号试剂盒中组分混用 ⑥温育时间、洗板、显色时...

ELISA测定中出现问题的可能原因(非试剂盒本身的原因),总结如下:


1、弱阳性质控样本检测不出温育的时间或温度不够;显色反应时间太短;所用配制缓冲液的蒸馏水有问题。


2、测定的重复性差,这是由于测定操作引起的问题,包括


①加样本及试剂量不准;孔间不一致


②加样过快,孔间发生污染


③加错样本


④加样本及试剂时,加在孔壁


⑤不同批号试剂盒中组分混用


⑥温育时间、洗板、显色时间不一致


⑦孔内污染杂物,


血清标本未完全凝固即加入,反应孔内出现纤维蛋白凝固或残留血细胞,易出现假阳性等。


3、全部孔都不显色


①漏加酶结合物;


②洗板液配制中出现问题


③漏加显色剂A或B


④终止剂当显色剂使用


4、全部板孔均有显色


①板不干净


②显色液变质


③洗板液受酶等污染