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贴壁细胞传代过程
日期：2024-05-16 09:23
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摘要：贴壁细胞传代过程（以一个T25瓶为例）：
1、 吸出原培养液；
2、 加入2ml左右PBS，轻轻晃动培养瓶润洗细胞，吸出PBS丢弃；
3、 加入1ml左右胰酶，轻轻晃动培养瓶使之浸润所有细胞，放入培养箱消化；
4、 消化时间跟据细胞特性有所不同，显微镜下看到细胞块中间的细胞明显分离变圆，侧立培养瓶细胞可以滑落时可终止消化，全程不要拍打培养瓶；
5、 加入3ml含血清的培养基终止消化，吹打细胞使之脱落并在液体里反复吹打使细胞，使之尽量呈单颗细胞的悬浮液，这时可以在显微镜看下；
6、 收集细胞悬液离心，1200rpm（约250g） 3分钟，离...
贴壁细胞传代过程（以一个T25瓶为例）：
1、 吸出原培养液；
2、 加入2ml左右PBS，轻轻晃动培养瓶润洗细胞，吸出PBS丢弃；
3、 加入1ml左右胰酶，轻轻晃动培养瓶使之浸润所有细胞，放入培养箱消化；
4、 消化时间跟据细胞特性有所不同，显微镜下看到细胞块中间的细胞明显分离变圆，侧立培养瓶细胞可以滑落时可终止消化，全程不要拍打培养瓶；
5、 加入3ml含血清的培养基终止消化，吹打细胞使之脱落并在液体里反复吹打使细胞，使之尽量呈单颗细胞的悬浮液，这时可以在显微镜看下；
6、 收集细胞悬液离心，1200rpm（约250g） 3分钟，离心完吸出上清丢弃。
7、 加入新鲜培养基，吹打几下混匀细胞即可，按需接种到新培养瓶，补足培养基，拧松瓶盖或使用透气瓶盖进行培养。
8、 检查培养箱二氧化碳，温度和水盘。
1、 吸出原培养液；
2、 加入2ml左右PBS，轻轻晃动培养瓶润洗细胞，吸出PBS丢弃；
3、 加入1ml左右胰酶，轻轻晃动培养瓶使之浸润所有细胞，放入培养箱消化；
4、 消化时间跟据细胞特性有所不同，显微镜下看到细胞块中间的细胞明显分离变圆，侧立培养瓶细胞可以滑落时可终止消化，全程不要拍打培养瓶；
5、 加入3ml含血清的培养基终止消化，吹打细胞使之脱落并在液体里反复吹打使细胞，使之尽量呈单颗细胞的悬浮液，这时可以在显微镜看下；
6、 收集细胞悬液离心，1200rpm（约250g） 3分钟，离心完吸出上清丢弃。
7、 加入新鲜培养基，吹打几下混匀细胞即可，按需接种到新培养瓶，补足培养基，拧松瓶盖或使用透气瓶盖进行培养。
8、 检查培养箱二氧化碳，温度和水盘。