参数规格:
产品名称 |
FluA/FluB/pdmH1N1(HA)/H3N2(HA) 亚型流感病毒荧光PCR检测试剂盒 |
英文名称 |
详见说明 |
货号 |
BJ-R015201 |
产品运输:低温运输
产品保存:-20℃保存
产品有效期:一年
产品特点:
◇高特异性:与其他病毒无交叉反应,无非特异性扩增;
◇高灵敏度:检测灵敏度可达10~100拷贝;
◇操作简便:该系列所有试剂均采用相同的体系和条件,可同时进行多个检测;
◇高通量:多种双重PCR检测以及三重PCR检测试剂盒。
实验过程:
一、试剂准备
1. DNA模板
2.对应目的基因的特异引物(在PCR反应中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能继续按照模板DNA复制,而不能从无到有,凭空合成。这一小段序列就是你所要有设计的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根据你的模板链设计。因此,扩增不同的基因需要设计不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步骤
1.在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5μl
dNTP mixl
4μl
引物1(10pM)
2μl
引物2(10PM)
2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2.调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,zui后在72℃ 保温7min。
3.结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4.PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μlLuFang进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
使用方法:
注:所有试剂使用前需完全解冻,混合均匀,6,000rpm离心数秒后使用。
1. 样本处理(样本处理区)
待检样本的核酸提取可采用病毒RNA提取试剂盒或自动化核酸提取仪等,具体提取方法请参照相关说明书;阳性质控品及阴性质控品无需提取,可直接使用。
2. 扩增试剂准备(PCR前准备区)
取N个(N=阴性质控品+待检样本+阳性质控品)PCR反应管,每管分别加入FMD RT-PCR反应液19μl、RT-PCR酶1 μl (也可根据每头份用量计算N+1份FMD RT-PCR反应液、RT-PCR酶所需总量,两者混匀离心后分装20 μl至单个PCR反应管)。
组分每头份用量FMD RT-PCR反应液19 μlRT-PCR酶。
1 .将所有PCR反应管于6,000rpm离心30s,转移至样本处理区。
2.加样(样本处理区)
3.在上述的PCR反应管中分别加入待检样本RNA提取物、阴性质控品和阳性质控品各5 μl,盖紧管盖,于6,000rpm离心10s,转移至扩增区。
NRG1 Others Human 人 NRG1-alpha (EGF Domain) 人细胞裂解液 (阳性对照) (1R,2S)-1-氨基-2-茚醇 质量规格:0.98(1R,2S)-(+)-cis-1-Amino-2-indanol
小鼠成纤维细胞完全培养基 100mLN-BOC-D-色氨醇质量规格:BR,>98%N-Boc-D-tryptophanol
MADB-106大鼠癌细胞 Breast cancer cells of MADB-106 rats 1640+10% FBSDL-苯甘氨醇 质量规格:>98%,BR2-Phenylglycinol
IL1RN Protein Human 重组人 IL-1RA / IL1RN 蛋白 (Fc 标签)甘氨酸-L-亮氨酸 质量规格:0.98Glycyl-L-leucine
Psi2 DAP(小鼠胚胎成纤维细胞) 5×106cells/瓶×2 AAV-293( 胚肾细胞)Amberlyst 15离子交换树脂(干)质量规格:干Amberlyst 15 ion-exchange resin
tTA基因修饰的小鼠胰腺癌细胞(B类);Pan02-CAG-tTA-2D1D-基葡萄糖盐酸盐shēng huà shì jì容量:25克
QGY-7701细胞,人肝癌细胞 人羊膜细胞,HA细胞 大鼠癌细胞;SHZ-884,4-二典联本 4,4'-Diiodobiphqnyl3001/12/8
KG-1(人急性骨髓性白血病细胞) 5×106cells/瓶×2CBZ-D-谷酸shēng huà shì jì容量:25克
Promocell C-25215 Hepatocyte Basal Medium (prf), 肝细胞基础培养基,无酚红 500mlpotewwiumchromate酸二钾5克CP
人肾小管上皮细胞;HKC70700-30-0腺嘌呤1酸盐;6-基嘌呤1酸盐;维生素B4;1酸腺素Adenine phosphate;VitaMin B4
FluA/FluB/pdmH1N1(HA)/H3N2(HA) 亚型流感病毒荧光PCR检测试剂盒CL-0404NCI-H596(人肺腺鳞癌细胞)5×106cells/瓶×2(±)-Carnitinexy7nochloride混旋肉碱盐酸盐1克AR,99%
NRK-52E,大鼠肾细胞 Sars蛋白表达株,293sars181A细胞 NCI-H1703 [H1703](人肺癌细胞)钴标准溶液 Cobclt 7440-48-4
人前列腺癌低转移细胞株;PC-3M-2B4pxenidone尼酮5毫克IND
BSG Others Mouse 小鼠 CD147 / EMMPRIN / Basigin 人细胞裂解液 (阳性对照) L-精酸100克
EB病毒转化的人B细胞;KMYFAMPNa2 5g/25g/100g/500g原装 Amresco 0634
注意事项:1.基础程序;2.扩增温度和延伸温度;3.反应时间;4.循环次数;5.PCR 反应液的配制;6.PCR技术的基本原理;7.PCR的反应动力学;8.PCR扩增产物;9.PCR反应体系与反应条件。产品仅用于科研