细胞培养步骤:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1) 准备DMEM-H培养基(DMEM-H:GIBCO,货号12800017, 添加NaHCO3 1.5g/L),90%;胎牛血清,10%。
2) 培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37摄氏度,培养箱湿度为70%-80%。
3) 冻存液:90%完全培养基,10%DMSO,现用现配。液氮储存。
二. 细胞处理:
1) 复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻,加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜(或将细胞悬液加入10cm皿中,加入约8ml培养基,培养过夜)。换液并检查细胞密度。
2) 细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
商品属性：
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产品名称 |
生长特性 |
货号 |
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NCTC clone 929 [L cell, L-929, derivative of Strain L]；小鼠成纤维细胞 |
贴壁生长 |
BJ-01X85367 |
细胞名称 NCTC clone 929 [L cell, L-929, derivative of Strain L]；小鼠成纤维细胞
形态特性 成纤维细胞
生长特性 贴壁生长
特征特性 1948年三月建立了NCTC clone 929(小鼠结缔组织)，细胞系L的克隆。细胞系L是*早建立的连续培养细胞系之一，而clone 929是*早的克隆株。 从一只100日龄的雄性C3H/An小鼠的正常皮下疏松结缔组织入脂肪组织中建立了亲本细胞系L。 第95代的细胞系L使用毛细管法分离单细胞建立了clone929。 检测发现鼠痘病毒阴性。
培养条件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle＇s Balanced Salts) 马血清，10%
传代方法 消化3-5分钟。1:2。3天内可长满。
传代情况 P(560+5)
冻存条件 完全培养基+8%DMSO
细胞STR鉴定服务流程：
肝窦内皮细胞HHSEC6-嘌呤-2'-脱氧核苷6-Mercaptopurine-2'-deoxyriboside质量规格：美国进口
SERPINA6 Others
Human SerpinA6 / CBG 细胞裂解液 (阳性对照) 奥美拉唑砜Omeprazole
Sulfone质量规格：美国进口
HSF 皮肤成纤维样细胞奥美拉唑N-氧化物Omeprazole N-Oxide质量规格：美国进口
CM-H131角膜成纤维细胞完全培养基100mL4-去甲氧基-4-硝基奥美拉唑硫化物4-Desmethoxy-4-nitro
Omeprazole Sulfide质量规格：美国进口
QGY-7701, 肝癌细胞5-羟基奥美拉唑钠盐5-Hydroxy Omeprazole Salt质量规格：美国进口鸢尾苷(标准品)
Tectoridin 质量规格：HPLC≥98%，标准品 大鼠谷氨酸脱羧酶自身抗体(GAD-Ab)ELISA检测试剂盒Ratglamicaciddecarboxylaseaoaibody,GAD-AbELISAKit
96T/48T
鸢尾黄素（标准品）
Tectorigenin 质量规格：HPLC≥98%，标准品 人膀胱肿瘤抗原(BTA)试剂盒 Human Bladder tumor aigen,BTA ELISA Kit
原B2(标准品) Procyanidin B2 质量规格：HPLC≥98%，标准品 RatVitaminE,VEELISAKit大鼠维生素E(VE)ELISA试剂盒规格：96T/48T
原人参二醇（标准品）
Protopanaxdiol 质量规格：HPLC≥98%，标准品 P16蛋白表达ELISA定量检测试剂盒25
原人参三醇(标准品) Protopanaxatriol 质量规格：HPLC≥98%，标准品 PorcineIerleukin1,IL-1ELISA试剂盒猪白介素1(IL-1)ELISA试剂盒规格：96T/48T
原薯蓣皂苷(标准品) Protodioscin 质量规格：HPLC≥98%，标准品 小鼠骨钙素(OC)ELISA试剂盒 ，英文名： OC ELISA Kit
原苏木素B/原巴西苏木素（标准品） Protosappanin B 质量规格：HPLC≥98%，标准品 人神经肽Y(NP-Y)ELISA检测试剂盒HumanneuropeptideY,NP-YELISAKit
96T/48T
远志酸（标准品）
Polygalacic acid 质量规格：HPLC≥98%，标准品 大鼠酸性成纤维细胞生长因子(aFGF/FGF-1)试剂盒 Rat
acidic fibroblast growth factor,aFGF/FGF-1 ELISA Kit
远志皂苷元(标准品) Senegenin 质量规格：HPLC≥98%，标准品 英文名称RatEpithelialneuophilactivatingpeptide-78ELISAKit大鼠上皮中性粒细胞活化肽(ENA-78)规格：96T/48T
月桂烯（香叶烯） Myrcene 质量规格：HPLC≥80%，标准品 环境无机0/游离0酸根离子比色法定量检测试剂盒20人胰岛素样生长因子2(IGF-2)酶联吸附测定试剂盒 别称:IGF2, IGF-II Human IGF-2(Insulin Like Growth Factor 2) ELISA Kit 用途 该试剂盒用于体外定量检测Human 血清，血浆或其他生物体液中天然及部分重组IGF-2浓度
细胞培养的优点：
1.研究的对象是活细胞产品仅用于科研
在实验过程中，根据要求可始终保持细胞活力，并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况，包括活细胞的形态、结构、生命活动等。
2.研究条件可以人为控制
pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件，可以根据实际进行人为的控制，同时，可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察，这些因素同样可以处于严格控制之下。
3.研究的样本可以达到比较均一性
通过细胞培养一定代数后，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞，需要时，可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。
4.研究内容便于观察、检测和记录
采用各种研究技术：如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备 记录方式可采用摄影照片、缩时电影、电视等多种手段。
NCTC clone 929 [L cell, L-929, derivative of Strain L]；小鼠成纤维细胞5.研究的范围比较广泛
应用的学科领域较为宽广，如细胞学、肿瘤学、生物化学、遗传学、分子生物学等；
适用的对象范围广，从低等动物到高等动物，一种动物的不同年龄阶段以及不同组织，都可进行有针对性的研究。
6.研究的费用相对较经济
可提供大量、同一时期、重复性好的、生物学性状相似的实验对象。